Способы и техника приготовления микроскопических препаратов

07.07.2015

При изучении фитопатологических объектов широко используется микроскоп и другие оптические приборы. Микроскоп (от греч. micros -малый, skopео - смотрю) - оптический прибор, предназначенный для изучения невидимых или слабо различимых невооруженным глазом объектов. Он применяется при различных микологических и фитопатологических исследованиях.
Наиболее распространенными биологическими микроскопами являются МБР-1, МБИ-1 и МБИ-2 с предельным увеличением до 1350 раз.
Для ознакомления с возбудителями болезней растений, в частности с грибами, зачастую требуется микроскопический анализ.
Микроскопические препараты готовят различными способами в зависимости от изучаемого материала. При наружном осмотре пораженного растения или его частей с помощью лупы устанавливают, имеется ли спороношение паразита и в какой форме или стадии.
Если спороношение имеет вид поверхностного налета или мелких точек, то в этом случае их снимают скальпелем или препаровальной иглой и переносят в каплю воды на предметное стекло. Налет осторожно расправляют иглой и затем накрывают покровным стеклом так, чтобы в препарате не оставалось пузырьков воздуха. Для этого покровное стекло ставят под углом на край капли и затем осторожно опускают. Избыток воды из препаратов следует удалять кусочком фильтровальной бумаги. В таком виде препарат рассматривают под микроскопом. Такой способ приготовления препаратов используют при изучении мучнисторосяных, ржавчинных, некоторых несовершенных и других грибов.
В том случае, если спороношение гриба находится в ткани (листа или хвои), делают микроскопические срезы ткани бритвой (или лезвием безопасной бритвы). Для этого скальпелем вырезают маленький кусочек пораженной ткани со спороношением, который закладывают в сердцевину стебля бузины или в кусочек пенопласта. Бузину или пенопласт предварительно надрезают на 1,0-1,5 см, в этот надрез вставляют кусочек ткани. После этого движением руки на себя делают тонкие поперечные срезы,
Срезы через плодоношения грибов делают непосредственно с пораженных тканей. Сначала делают вертикальный надрез через середину плодового тела, отсекают и отбрасывают одну половину. Затем параллельно полученному срезу, по вертикальной стенке, делают срезы толщиной не более нескольких микрометров. Обычно делают несколько срезов и выбирают из них 1-2 наиболее тонких. Срезы помещают на предметное стекло в каплю воды, покрывают покровным стеклом и рассматривают под микроскопом. Гербарный материал предварительно размачивают или кипятят в воде для восстановления его гибкости.